• Les tests biologiques

Pour confirmer un diagnostic et prouver que l’agent pathogène isolé est bien responsable des symptômes observés, des inoculations artificielles de la bactérie sont effectuées sur la plante hôte dans des conditions favorables à l’infection.

Le postulat de Koch :

Il précise les étapes successives qui doivent être validées pour pouvoir établir une relation causale entre une maladie et un microorganisme.

Les étapes du postulat de Koch appliqué à la phytopathologie s'énoncent comme suit :

1. L'agent doit être présent chez les plantes malades, et absent chez les plantes saines;

2. L'agent doit pouvoir être isolé de plantes malades et multiplié en culture axénique*;

3. Lorsque l'agent en culture pure est inoculé à une plante saine, il doit induire des symptômes caractéristiques de la maladies ;

4. On doit pouvoir réisoler l'agent initial à partir des plantes infectées expérimentalement.

Ce postulat fait appel à un ensemble de techniques :

  • d'observation (microscopie), nécessaires pour la détection et l'identification du parasite in situ,
  • d'isolement de l'agent pathogène à partir des tissus de l'hôte,
  • de méthodes de production de l'inoculum en culture pure
  • et d'inoculation des plantes-hôtes en laboratoire.

Dans la pratique, le diagnostic de beaucoup de maladies classiques n'exige pas la réalisation complète du postulat de Koch. Selon les cas, on s'arrêtera à l'observation des agents ou à leur isolement. (Extrait de Phytopathologie, De Boeck)

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  • L'isolement : étape de base pour le diagnostic
  • Les milieux utilisés pour l'isolement doivent satisfaire les besoins nutritifs et énergétiques des bactéries à cultiver. Ce sont des préparations nutritives liquides ou solides destinées à la croissance de microorganismes en laboratoire.

  • Identification par les caractères morphologiques et cytologiques
  • Une fois la bactérie isolée, l’observation de ses caractères morphologiques et cytologiques peut orienter le diagnostic et aider à l'identification de la bactérie responsable de la maladie.